一、污水中应含有充足的电子供体（一般BOD5/TKN>4），TKN凯氏氮，水质监测指标的一项。它包括氨氮和在此条件下能转化为铵盐而被测定的有机氮化合物。此类有机氮化合物主要有蛋白质、氨基酸、肽、胨、核酸、尿素以及合成的氮为负三价形态的有机氮化合物。通常可以简单的理解为水中氨氮和有机氮的总和。
二、厌氧或缺氧条件，当污水中的可降解有机物不足时，则需要额外投加营养物。CH3COOH+8NO3-→6H2O+10CO2+4N2+8OH-+能从式子中可以看出，所谓碳源并不是给反硝化提供碳，而是作为还原剂提供电子。
乙酸钠：若以乙酸钠（CH3COONa)作为碳源，是小分子有机酸的原因， 反硝化菌易于利用，脱氮效果是较好的。一般冬天时投加碳源，都是建议可以选择乙酸钠作为碳源投加，易溶于水，易被微生物所利用，所产生的污泥量相比于其他碳源时略高。